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1. 膠體金標(biāo)記
膠體金是由氯金酸在還原劑作用下生成的納米級金顆粒,表面帶有負(fù)電荷,能夠與蛋白質(zhì)(如抗體)通過靜電吸附或共價(jià)結(jié)合形成穩(wěn)定的復(fù)合物。這種標(biāo)記過程保留了抗體的免疫活性,同時(shí)賦予其膠體金的顯色特性。
2. 免疫反應(yīng)
當(dāng)待測樣本中含有目標(biāo)抗原時(shí),抗原會(huì)與膠體金標(biāo)記的抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物。這一反應(yīng)具有高度的特異性和靈敏性。
3. 層析分離
試紙條的層析膜(通常為硝酸纖維素膜)具有毛細(xì)作用,能夠使液體樣本在膜上移動(dòng)。膠體金標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物隨液體移動(dòng),經(jīng)過預(yù)先固定在膜上的檢測線和質(zhì)控線。
4. 信號檢測
檢測線(T線):固定有另一種與目標(biāo)抗原特異性結(jié)合的抗體。當(dāng)膠體金標(biāo)記的復(fù)合物經(jīng)過檢測線時(shí),會(huì)被捕獲并聚集,形成可見的紅色條帶。
質(zhì)控線(C線):固定有與膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合的抗體,用于驗(yàn)證試紙條的有效性。無論樣本中是否含有目標(biāo)抗原,質(zhì)控線都應(yīng)顯色。
5. 結(jié)果判讀
陽性結(jié)果:檢測線和質(zhì)控線均顯色,表示樣本中含有目標(biāo)抗原。
陰性結(jié)果:僅質(zhì)控線顯色,表示樣本中不含有目標(biāo)抗原。
無效結(jié)果:質(zhì)控線未顯色,表示試紙條失效,需重新檢測。
6. 技術(shù)優(yōu)勢
快速高效:檢測時(shí)間通常為10-15分鐘,適合現(xiàn)場快速檢測。
操作簡便:無需復(fù)雜設(shè)備或?qū)I(yè)技能,普通人員即可操作。
高靈敏度:能夠檢測低濃度的目標(biāo)物質(zhì),適用于早期疾病篩查。
可視化結(jié)果:通過肉眼即可判讀檢測結(jié)果,無需復(fù)雜儀器。
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