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CD45RA抗體試劑的定義與分子特性
發(fā)布日期:2025-05-20 | 瀏覽次數(shù):
一、CD45RA的定義

CD45RA抗體試劑是針對CD45RA蛋白開發(fā)的單克隆或多克隆抗體,用于檢測該蛋白在細(xì)胞或組織中的表達(dá)。CD45RA是CD45(白細(xì)胞共同抗原,Leukocyte Common Antigen, LCA)的剪接異構(gòu)體,屬于受體型酪氨酸磷酸酶(PTP)家族,廣泛表達(dá)于造血細(xì)胞(如T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞等),但在紅細(xì)胞和血小板中不表達(dá)。

功能定位:CD45RA主要作為免疫細(xì)胞分群的標(biāo)志物:

原始T細(xì)胞(Na?ve T cells):CD45RA+的T細(xì)胞未接觸過抗原,處于靜息狀態(tài)。

B細(xì)胞及淋巴瘤:CD45RA高表達(dá)于正常B細(xì)胞及部分B細(xì)胞淋巴瘤(如濾泡性淋巴瘤)。

免疫信號調(diào)控:通過調(diào)節(jié)Src家族激酶活性,影響T/B細(xì)胞受體信號傳導(dǎo)、細(xì)胞存活及凋亡。

二、分子特性1. 分子量與結(jié)構(gòu)

分子量:CD45RA的分子量為205-220 kDa(糖基化后),具體差異由外顯子剪接和翻譯后修飾決定。

結(jié)構(gòu)特征:

外顯子剪接:CD45基因(PTPRC)包含A、B、C三個可變外顯子,通過差異剪接生成不同異構(gòu)體。CD45RA包含外顯子A(ABC或BC剪接形式),而CD45RO則不含A外顯子。

跨膜結(jié)構(gòu)域:由單鏈I型糖蛋白構(gòu)成,含高度保守的胞內(nèi)酪氨酸磷酸酶結(jié)構(gòu)域,胞外區(qū)因剪接不同而具有可變性。

2. 基因與蛋白信息

基因名稱:PTPRC(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type C),Entrez Gene ID:5788,UniProt ID:P08575。

蛋白別名:包括CD45抗原、L-CA(白細(xì)胞共抗原)、B220(小鼠中B細(xì)胞標(biāo)志)等。

3. 表達(dá)特征

細(xì)胞類型特異性:

細(xì)胞類型CD45RA表達(dá)水平生物學(xué)意義
原始T細(xì)胞(CD4+/CD8+)高表達(dá)未接觸抗原,處于靜息狀態(tài)
記憶T細(xì)胞(CD45RO+)不表達(dá)與CD45RA互補(bǔ)定義T細(xì)胞亞群
B細(xì)胞及淋巴瘤高表達(dá)(>90% B細(xì)胞淋巴瘤)用于B細(xì)胞腫瘤鑒別診斷
單核細(xì)胞部分表達(dá)功能尚未完全明確
4. 功能機(jī)制

信號調(diào)控:

通過去磷酸化激活 Src家族激酶(如Lck、Fyn) ,增強(qiáng)T細(xì)胞受體(TCR)和B細(xì)胞受體(BCR)信號傳導(dǎo)。

抑制JAK激酶活性,調(diào)節(jié)細(xì)胞因子受體信號通路。

細(xì)胞生存與凋亡:

通過整合素信號通路促進(jìn)細(xì)胞存活。

在凋亡過程中參與DNA碎片化。

三、CD45RA抗體的應(yīng)用特性1. 抗體克隆與特異性

常用克?。篔S-83(eBioscience)、MEM-56(Invitrogen)、4KB5(基因科技)、HI100(BioLegend)等。

特異性驗證:需通過Western blot、流式細(xì)胞術(shù)或免疫組化確認(rèn)與CD45RA的ABC/BC剪接形式結(jié)合,而非其他CD45異構(gòu)體(如CD45RO)。

2. 實驗優(yōu)化要點

流式細(xì)胞術(shù):推薦使用APC-Cy7或PE-Cy7熒光染料,避免藍(lán)色染料(如CF?405S)因低熒光強(qiáng)度導(dǎo)致背景干擾。

免疫組化(IHC) :需高pH熱修復(fù)(如pH9.0 EDTA緩沖液)以暴露抗原表位,陽性對照建議使用扁桃體或淋巴結(jié)組織。

四、相關(guān)疾病與臨床意義

免疫缺陷:CD45功能障礙與 嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID) 相關(guān)。

腫瘤診斷:CD45RA+多見于B細(xì)胞淋巴瘤,而CD45RO+常見于T細(xì)胞淋巴瘤,聯(lián)用CD45RA/CD45RO抗體可輔助鑒別。

感染與炎癥:CD45RA表達(dá)變化與丙型肝炎病毒(HCV)感染及慢性炎癥狀態(tài)相關(guān)。


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