CD45RA抗體是研究免疫細胞亞群的關鍵工具，尤其在區(qū)分T細胞功能狀態(tài)（原始T細胞與記憶T細胞）中具有核心作用：

T細胞亞群鑒定

CD45RA與CD45RO互補表達：原始T細胞（Na?ve T cells）高表達CD45RA，而記憶T細胞（Memory T cells）表達CD45RO。通過聯(lián)用CD3/CD4/CD8抗體，可明確T細胞的功能亞群。

應用實例：在HIV/AIDS研究中，CD45RA/CD45RO聯(lián)用可追蹤CD4+ T細胞亞群的耗竭與恢復，評估免疫狀態(tài)。

B細胞與單核細胞標記

CD45RA在正常B細胞和B細胞淋巴瘤（如濾泡性淋巴瘤）中高表達，是B細胞分型的重要標志。

單核細胞中部分亞群也表達CD45RA，但其功能意義尚待深入探索。

CD45RA抗體在血液腫瘤的鑒別診斷中具有重要價值：

淋巴瘤分型

B細胞淋巴瘤：CD45RA高表達于大多數(shù)B細胞淋巴瘤（如濾泡性淋巴瘤），而T細胞淋巴瘤通常為CD45RO陽性。

白血病亞型分析：CD45RA可區(qū)分白血病B細胞系（如Raji細胞）與其他血液腫瘤細胞。

腫瘤微環(huán)境研究

通過免疫組化（IHC）檢測腫瘤組織中CD45RA+淋巴細胞浸潤，可評估抗腫瘤免疫反應的強度。

CD45RA參與免疫信號通路的調控，其抗體用于探索以下機制：

Src家族激酶調控

CD45RA通過去磷酸化激活Lck、Fyn等激酶，增強T/B細胞受體（TCR/BCR）信號傳導。

細胞生存與凋亡

通過整合素信號通路促進細胞存活，并在凋亡過程中參與DNA碎片化。

細胞因子信號調節(jié)

抑制JAK激酶活性，調控IL-2、IFN-γ等細胞因子的信號傳導。

CD45RA表達變化與多種疾病相關，其抗體用于以下研究：

感染性疾病

丙型肝炎（HCV） ：CD45RA+ T細胞比例變化與慢性炎癥狀態(tài)相關。

HIV感染：監(jiān)測CD45RA+原始CD8+ T細胞的恢復情況，評估抗病毒治療效果。

免疫缺陷疾病

CD45功能障礙與嚴重聯(lián)合免疫缺陷（SCID）相關，抗體用于模型動物的免疫表型分析。

CD45RA抗體廣泛用于多種實驗技術，需根據應用優(yōu)化條件：

多色標記策略：推薦使用APC-Cy7、PE-Cy7等高靈敏度熒光染料，避免藍色染料（如CF?405S）因低熒光強度導致背景干擾。

補償控制：使用BD CompBeads時需注意光譜差異，部分染料（如BUV661）需克隆特異性補償。

樣本處理：全血樣本需溶血處理（如BD FACS Lysing Solution），固定細胞需優(yōu)化抗體濃度（≤1.0 μg/10?細胞）。

石蠟切片處理：需脫蠟和抗原修復（高pH EDTA緩沖液），推薦陽性對照為扁桃體組織。

抗體稀釋：濃縮抗體建議1:200稀釋，室溫孵育30分鐘。

分子量檢測：CD45RA在WB中顯示205-220 kDa條帶，需通過敲除實驗驗證特異性。

ELISA定量：雙抗體夾心法檢測小鼠CD45RA，靈敏度達25 ng/mL，需避免反復凍融樣本。

免疫沉淀（IP） ：用于研究CD45RA與其他信號蛋白（如整合素）的相互作用。

細胞內染色（ICC） ：需透膜處理（如Triton-X），聯(lián)用細胞表面標記（如CD3）增強特異性。

克隆與物種特異性

常用克隆：HI100（人源）、4KB5（人源）、OX-33（大鼠B細胞特異性）。

物種適用性：人、大鼠、小鼠、犬和非人靈長類抗體均有商業(yè)化產品。

實驗優(yōu)化策略

濃度滴定：流式細胞術中活細胞推薦0.25 μg/10?-10?細胞，固定細胞需降低濃度。

封閉劑選擇：使用5% BSA或同源血清封閉非特異性結合，添加0.1% Triton-X增強封閉效果。